PCR - MOLEKULÆR BIOLOGI
Du ønsker å:
- bestemme en sekvens for å identifisere mutasjoner (punktmutasjoner (SNP-er), innsettinger, slettinger)
- vurdere slektskap mellom individer eller populasjoner
- påvise tilstedeværelsen av en gitt organisme i et biologisk prøve
- utføre kloning i en uttrykksvektor for syntese av et rekombinant protein...
Disse analysene krever vanligvis en amplifisering av genetisk materiale gjennom en enzymatisk reaksjon kalt PCR (Polymerase Chain Reaction). Denne reaksjonen utføres vanligvis fra DNA. For noen spesifikke applikasjoner brukes cDNA som utgangspunkt, oppnådd ved revers transkripsjon av RNA.
Prinsipp for metoden
DNA-molekyler, i sin naturlige tilstand, består av to komplementære tråder. Overgangen til en temperatur over 94 °C fører til separasjon av de to DNA-trådene og ødeleggelse av sekundære strukturer (denatureringsstadiet).
Molekylene...